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【液相色谱仪】高效液体色谱的理论和实践的关

时间:2015-08-10 09:08来源:未知 作者:yzyq 点击:

    【液相色谱仪】高效液体色谱的理论和实践的关系
    近年来,液体色谱由于获得了前所未有的快速分离,重又引起了人们的注意,这个进展主要是由于柱效率的改进和采用了高的移动相流速所致。本章将叙述这些新的进展,并指出它们与色谱基础的关系。
    经典柱液体色谱是一个行之有效的分离方法,直径约为1/2英寸的柱,装以颗粒直径为100-150微米的填充物,移动相借重力作用缓慢流过色谱柱,样品被分级收集后,再进行分析,柱效率低和分离时间长是这个传统方法的特点。
    在新的操作方法中,采用了小口径的柱(约1-3毫米)及粒径小于50微米的载体,现在也已采用了特殊设计的颗粒(多孔层微球),将洗脱剂以高速泵入柱内,形成了显著的压力降。
    对于挥发性样品来说,气体色谱是非常有效的分离方法,但它无法对付分子量超过约300的组分以及热分解或离子型的物质,而液体色谱对于这类样品的分离却具有最大的适用性,尤其是分子量范围从300-1000-2000的组分(不包括凝胶渗透色谱)、离子型(离子交换色谱)及易热降解(柱温~25℃)的物质都可成功的进行色谱分离,因此气体色谱和高速液体色谱是互补短长的。
    从事高速液体色谱的工作者都有一定的气体色谱工作经验,虽然这个经验是有益的,但是必须注意,在这两个技术之间有一些基本的不同点,如果不加注意,在初接触高速液体色谱时,就可能遇到麻烦,例如,气体色谱中的柱外效应,如慢的进样和死体积,一般可以忽略不计,但在液体色谱中,特别是在高效柱的场合,这些效应就不容忽视。
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